分光光度計是目前化驗室中使用比較廣泛的一種分析儀器，其測定原理是利用物質對光的選擇性吸收性，以較的單色光作為入射光，測定物質對光的吸收，從而確定溶液中物質的含量。在比色分析中，有色物質溶液顏色的深度決定于入射光的強度、有色物質溶液的濃度及液層的厚度。當一束單色光照射溶液時，入射光強度愈強，溶液濃度愈大，液層厚度愈厚，溶液對光的吸收愈多，它們之間的關系，符合物質對光吸收的定量定律。
1、在使用儀器前，必須仔細閱讀其使用說明書。
2、若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新調零及滿度后，再測量。
3、指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
4、操作人員不應輕易觸動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5、放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。
6、比色皿使用時要注意其方向性，并應配套使用，以延長其使用壽命。新的比色皿使用前必須進行配對選擇，測定其相對厚度，互相偏差不得超過2%透光度，否則影響測定結果。使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈（測定有色溶液后，應先用相應的溶劑或（1+3）的硝酸進行浸泡，浸泡時間不宜過長，再用蒸餾水沖洗干凈），并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
7、比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。先，應保證比色皿不傾斜。因為稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還有可能使入射光不能全部通過樣品池，導致測試準確度不符合要求。其次，應保證每次測試時，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重復性或準確度。
8、干燥劑的使用問題。干燥劑失效將會導致以下問題：①數顯不穩，無法調零或滿度。②反射鏡發霉或沾污，影響光效率，雜散光增加。因此分光光度計應放置在遠離水池等濕度大的地方，并且干燥劑應定期更換或烘烤。
9、分光光度計的放置位置應符合以下條件：避免直射；避免強電場；避免與較大功率的電器設備共電；避開腐蝕性氣體等。
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